## 人表皮细胞活化肽因子ELISA检测试剂盒操作步骤

### 1. 准备工作

首先，从冰箱中取出人表皮细胞活化肽因子ELISA检测试剂盒，并在室温下放置30分钟以复温平衡。

### 2. 配制洗涤液

使用蒸馏水将20倍浓缩的洗涤液稀释至原倍的洗涤液，以备后续使用。

### 3. 加入标准品和样本

取适量酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔及空白对照孔，记录各孔位置。在标准品孔中加入50μL标准品；在待测样本孔中先加入10μL待测样本，再加入40μL样本稀释液（即样本稀释5倍）；空白对照孔不需添加任何物质。

### 4. 温育

将酶标板放置于37℃的水浴锅或恒温箱中，温育30分钟，以确保反应充分。

### 5. 洗板步骤

弃去各孔内液体，使用吸水纸拍干。每孔加入满洗涤液，静置1分钟后甩去洗涤液，再次拍干。此过程需重复4次，确保彻底清洗各孔。

### 6. 添加酶标工作液

在每个孔中加入50μL酶标工作液，空白对照孔不加。

### 7. 再次温育

重复步骤4，将酶标板放置于37℃恒温箱中进行第二次温育。

### 8. 再次洗板

如步骤5所述，再次进行洗涤，以确保未结合的成分彻底清除。

### 9. 显色反应

温育结束后，在每个孔中先加入50μL显色剂A液，再加入50μL显色剂B液，在37℃下避光显色15分钟，以确保反应顺利进行。

### 10. 终止反应

显色结束后，取出酶标板，在每个孔中加入50μL终止液，从而终止显色反应，颜色会由蓝色转为黄色，颜色深浅与样品中表皮细胞活化肽因子的含量成正比。

### 11. 测定与计算

使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度值，并根据标准品的吸光度值绘制标准曲线。借助这条标准曲线，可以查找待测样品的浓度。最终浓度需根据实际测量浓度乘以稀释倍数进行计算。

在整个实验过程中，要依据说明书严格执行各项操作，确保实验结果的准确性。此外，整个步骤的高效运行和清晰的实验设计，将直接影响结果。通过人生就是博-尊龙凯时的产品，您能够获得更为精准的检测体验，助力科研与临床诊断的成功。