在细胞冻存领域,DMSO长期以来被广泛应用作为渗透性冷冻保护剂,但它对细胞存在一定的毒性风险。为了解决这一问题,上海中乔新舟推出了一种无DMSO无血清的细胞冻存液,为细胞冻存提供了全新的解决方案!
安全与效率并重
中乔新舟的冻存液采用创新的特殊冷冻保护剂,完全不含DMSO,这不仅提高了安全性,更显著提升了冻存效率。其独特的配方可以有效避免DMSO对细胞的潜在毒害,同时在多种细胞株系中稳定表现,简化了操作流程,无需程序性降温,从而大大节省了实验时间和成本。
特殊冷冻保护剂的优势
中乔新舟所采用的特殊冷冻保护剂是市场上首款使用这种先进冷冻技术的细胞冻存液产品。这种创新成分具有优异的生物相容性,能够在冷冻过程中有效延缓冰晶的形成,减少冰晶对细胞结构及细胞间挤压所造成的损伤,保持细胞形态的完整性,显著提高细胞复苏后的存活率和活力。
-80℃下的稳定保存
中乔新舟无DMSO无血清细胞冻存液在-80℃条件下能够实现长期稳定保存,消除了因设备问题导致的轻微融化风险。实验表明,即使在常温条件下,该冻存液也能在数小时内保持细胞的高活性。此外,复苏后无需立即离心处理,可以在传代时再进行,简化了实验步骤,提高了整体效率,为科研工作带来更多便利。
冻存效果的案例对比
细胞系 | 中乔新舟冻存液细胞复苏存活率 | 传统冻存液细胞复苏存活率 |
---|---|---|
HSF人皮肤成纤维细胞 | 926% | 902% |
GLI261小鼠神经胶质瘤细胞 | 853% | 842% |
4T1小鼠乳腺癌细胞 | 917% | 853% |
K562人慢性髓原白血病细胞 | 928% | 924% |
HL-60人原髓细胞白血病细胞 | 683% | 369% |
Caco-2人结肠腺癌细胞 | 813% | 551% |
HUVEC人脐静脉内皮细胞 | 699% | 385% |
操作流程
细胞冻存步骤
1. 确保细胞在对数生长期,将细胞悬浮液收集于离心管中。
2. 根据细胞密度和冻存管的尺寸,确定所需冻存细胞数量。将细胞悬浮液放入离心管中,200×g(贴壁细胞)或150×g(悬浮细胞)离心5分钟,去除上清液,保留细胞沉淀。
3. 在离心管中加入少量中乔新舟细胞冻存液,使细胞浓度约为5×104-1×106/μl,轻轻混匀,制成细胞悬液。
4. 在冻存管中加入10μL细胞悬液,再加入990μL细胞冻存液,轻轻混匀。
5. 将冻存管放入37℃培养箱中孵育一小时。
6. 完成孵育后,冷却冻存管至室温,直接置于-80℃超低温冰箱中。
7. 若需在液氮中长期保存,可在-80℃冰箱中放置一天后再转移至液氮罐。
细胞复苏步骤
1. 将细胞冻存管从超低温环境中取出,立即放入37℃水浴中快速解冻。
2. 待细胞混合液完全解冻后,立即加入适量细胞培养基混匀。
3. 将细胞混合液转移至培养瓶中,镜检后可根据需求进行常规细胞培养。
4. 培养2-5天后,将混合液转移至离心管中进行离心,200×g(贴壁细胞)或150×g(悬浮细胞)离心5分钟,去除上清液,重新分散于细胞培养基中。
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