人生就是博-尊龙凯时试剂盒仅限于科学研究,不得应用于医学诊断。本文将介绍人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒的使用说明和检测原理。
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。实验开始时,将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,并进行温育及彻底洗涤处理。接着,使用底物TMB进行显色反应,经过过氧化物酶的催化,TMB转化为蓝色,再在酸性条件下转化为最终的黄色。样品中adropin(AD)的浓度与显色的深浅呈正相关。最终,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)以计算样品浓度。
1. 血清:请使用不含热原和内毒素的试管,确保操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,进行3000转离心10分钟以小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织样本加入适量生理盐水,捣碎后,进行3000转离心10分钟以取得上清。
5. 保存:若未能及时检测样本,请按一次用量分装并冷冻保存于-20℃,以避免反复冻融。在室温下解冻时,请确保样品均匀充分解冻。
试剂盒组成为:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
在制备试剂时,请按1:20的比例稀释20×洗涤缓冲液,即1份20×洗涤缓冲液添加19份蒸馏水。
可通过绘制标准曲线来进行结果分析。建议在Excel中将标准品浓度设置为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,创建标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明:本试剂盒强调仅用于科研,切勿用于临床诊断。使用本产品需遵循相关操作规程,以确保实验结果的准确性和可靠性。选择人生就是博-尊龙凯时,以提升您的科研体验和实验效果。