人生就是博-尊龙凯时的哺乳动物蛋白提取试剂盒，包含以下成分：5XBuffer（10ml）、5XNaCl（10ml）、5XSDS（10ml）、5XDOC（10ml）、5XNP-40（10ml）、20XPBS（10ml）和Protease inhibitor cocktail（0.5ml）。这款试剂盒在常温下保存，唯一需要在-20°C下存放的成分为Protease inhibitor cocktail，保质期为24个月。

蛋白提取步骤：

1. 准备细胞裂解缓冲液：根据5XBuffer、5XNaCl、5XSDS、5XDOC和5XNP-40以1:1:1:1:1（v/v）的比例混合，配制细胞裂解缓冲液。每1ml细胞裂解缓冲液适用于提取106~107个细胞或5~20mg组织的蛋白。在使用前，加入10μl的Protease inhibitor cocktail。

2. 洗涤细胞或组织：

a. 对于贴壁细胞：去除培养基后，用PBS缓冲液冲洗细胞两次，随后加入细胞裂解缓冲液（106~107个细胞/ml）。将细胞置于冰袋中，在摇床上孵育30分钟，定期重悬细胞，最后刮取并收集裂解液。

b. 对于悬浮细胞：在700g离心5分钟，弃去上清液。用PBS重悬并洗涤细胞两次，置于4°C进行离心以去除上清液。将沉淀重悬于细胞裂解缓冲液中（106~107个细胞/ml），再次浸入冰袋内，在摇床上孵育30分钟。

c. 对于组织样品：将组织切成小块，用PBS冲洗两次。加入细胞裂解缓冲液（5~20mg组织/ml），然后将样品转移到预冷的微量匀浆器中，在冰上均质30~50次。均质过程中需确保靶蛋白的功能完整性。随后在4°C下以12,000xg离心10分钟以沉淀细胞碎片，或者以100,000xg高速离心45分钟以获得蛋白质溶液。

3. 收集蛋白质上清液：将含有蛋白质的上清液转移至冷冻管中。在冰上保存以供立即使用，或将其保存在-70°C以备后续研究。

选择人生就是博-尊龙凯时的蛋白提取试剂盒，确保您在生物医学研究中获得高效的蛋白提取效果，从而推动实验进展。