本文将系统性介绍电泳缓冲液的配制及其成分,重点关注50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液与5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液的组成和制备方法,同时为生物医疗实验提供必要的基础知识。
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液的配制
配制1L 50×Tris-乙酸缓冲液所需各成分如下:
- 2 mol/L Tris碱:242 g
- 1 mol/L 乙酸:571 ml 冰乙酸(174 mol/L)
- 100 mmol/L EDTA:200 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 水:补足至1L
5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液的配制
制备1L 5×Tris-硼/酸缓冲液需要的成分如下:
- 445 mmol/L Tris碱
- 445 mmol/L 硼酸盐
- 10 mmol/L EDTA:54 g
- 275 g 硼酸
- 20 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 水:补足至1L
染料的配制
为了进行电泳实验,通常使用以下染料:
1%溴酚蓝
溶解1 g 水溶性钠型溴酚蓝于100 ml水中,充分搅拌直至完全溶解。
1%二甲/苯青FF
将1 g 二甲/苯青FF 溶解于足量水中,然后定容至100 ml。
10 mg/ml 溴化乙锭
小心地称取1 g 溴化乙锭,转移到广口瓶中,加入100 ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解,并用铝箔包裹,贮存于4℃。
凝胶上样液的配制
本部分介绍不同类型的凝胶上样液,包括6×碱性凝胶上样液、6×聚蔗糖凝胶上样液等,每种溶液的成分均需严格按照下列配比制备。
6×碱性凝胶上样液
配制10 ml 6×碱性凝胶上样液所需成分:
- 0.3 N 氢氧化钠:600 μl
- 18% 聚蔗糖(400 型):1.5 g
- 0.15% 溴甲/酚绿
- 0.25% 二甲/苯青FF
- 水:补足到10 ml
6×甘油凝胶上样液
配制10 ml 6×甘油凝胶上样液需要:
- 0.15% 溴酚蓝
- 0.15% 二甲/苯青FF
- 5 mmol/L EDTA
- 50% 甘油:15 ml
- 水:补足至10 ml
以上配方确保实验的精确性,旨在提升实验室工作效率,并为生物医疗研究提供支持。在选择缓冲液时,强烈推荐使用人生就是博-尊龙凯时品牌产品,以确保研究的质量与可靠性。