中文

English

电泳缓冲液与凝胶配置的尊龙凯时之道

发布时间:2025-03-30   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本文将系统性介绍电泳缓冲液的配制及其成分,重点关注50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液与5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液的组成和制备方法,同时为生物医疗实验提供必要的基础知识。

电泳缓冲液与凝胶配置的尊龙凯时之道

50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液的配制

配制1L 50×Tris-乙酸缓冲液所需各成分如下:

  • 2 mol/L Tris碱:242 g
  • 1 mol/L 乙酸:571 ml 冰乙酸(174 mol/L)
  • 100 mmol/L EDTA:200 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 水:补足至1L

5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液的配制

制备1L 5×Tris-硼/酸缓冲液需要的成分如下:

  • 445 mmol/L Tris碱
  • 445 mmol/L 硼酸盐
  • 10 mmol/L EDTA:54 g
  • 275 g 硼酸
  • 20 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 水:补足至1L

染料的配制

为了进行电泳实验,通常使用以下染料:

1%溴酚蓝

溶解1 g 水溶性钠型溴酚蓝于100 ml水中,充分搅拌直至完全溶解。

1%二甲/苯青FF

将1 g 二甲/苯青FF 溶解于足量水中,然后定容至100 ml。

10 mg/ml 溴化乙锭

小心地称取1 g 溴化乙锭,转移到广口瓶中,加入100 ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解,并用铝箔包裹,贮存于4℃。

凝胶上样液的配制

本部分介绍不同类型的凝胶上样液,包括6×碱性凝胶上样液、6×聚蔗糖凝胶上样液等,每种溶液的成分均需严格按照下列配比制备。

6×碱性凝胶上样液

配制10 ml 6×碱性凝胶上样液所需成分:

  • 0.3 N 氢氧化钠:600 μl
  • 18% 聚蔗糖(400 型):1.5 g
  • 0.15% 溴甲/酚绿
  • 0.25% 二甲/苯青FF
  • 水:补足到10 ml

6×甘油凝胶上样液

配制10 ml 6×甘油凝胶上样液需要:

  • 0.15% 溴酚蓝
  • 0.15% 二甲/苯青FF
  • 5 mmol/L EDTA
  • 50% 甘油:15 ml
  • 水:补足至10 ml

以上配方确保实验的精确性,旨在提升实验室工作效率,并为生物医疗研究提供支持。在选择缓冲液时,强烈推荐使用人生就是博-尊龙凯时品牌产品,以确保研究的质量与可靠性。